【www.tuzhexing.com--医学类】
【摘要】目的 研究广州地区风湿热易感自然人群A组链球菌（GAS）T型的分布状况。方法从1990年5月至1991年4月，对广州地区9～14岁学龄儿童共453名（城市250名，农村203名）每月取咽拭子培养1次，分离β-溶血性链球菌后，采用兰菲分组鉴定出GAS共732株，对GAS采用凝集法进行T分型。结果 广州市学龄儿童携带的GAS的T型以T6(20.5%)、T4(12.0%)、T12(10.9%)多见。T型分布无性别差异(P＞0.05)，但有季节差异。同一学校不同班级有不同的 T型分布。不可分型菌株占13.3%。结论 1990～1991年广州地区学龄儿童流行GAS的T型主要以T6、4、12为多见；不同时期和不同地区流行GAS的T型分布存在差异。
Epidemic trends of T-typing of group A streptococci in guangzhou area
【Abstract】Objective To investigate the epidemic trends of the T typing of group A hemolytic streptococci (GAS) isolated from Guangzhou school children in China from 1990 to 1991.Methods 732 group A streptococci were isolated from throat culture of 453 school children aged 9～14 years in Guangzhou City, South China from May 1990 to April 1991. Their T-type detection rates, T-type epidemics, monthly isolation rates, and isolation rates by sex were analysed epidemiologically.Results Among the children, the most common serotype was T6 (20.5%),followed by T4(12.0%), and T12 (10.9%). The main serotype in Guangzhou urban areas was T6 (30.6%), and in the rural areas was ;T12 (21.0%). There was statistically significant difference (P＜0.005) between urban and rural areas. There was no significant difference between male and female, but quite difference in different seasons. Different class in the same school had different T serotype distribution. Non-typable strains reached 13.3%.Conclusion The dominant prevalent strains of GAS were T6, 4, 12 in Guangzhou school children， South China from 1990 to 1991. The distribution of GAS T-typing varied from different regions and periods.
【Key words】Streptococci pyogenes;Bacterial typing techniques;Rheymatic fever
研究证实，风湿热 (RF)的发生仅与 A组溶血性链球菌（GAS）上呼吸道感染有关，因而对GAS分型的分布状况研究显得非常重要。国外对风湿热易感自然人群（5～18岁）中携带GAS血清学分型已进行了大量的研究，对风湿热的流行病学、预防和控制以及对GAS疫苗的研制均具有重要的意义。在我国，对此方面的研究较少。由于M蛋白容易丢失，其抗血清难以制备，通过对GAS菌株的 T型推断 M型的流行分布趋势，使 T型变得更加重要。我们分析了广州地区 RF易感人群携带GAS者菌株的 T型的分布，拟推测相应的 M型流行趋势，为研制适合我国国情的 M分型抗血清和有效的GAS疫苗奠定重要
要的基础。
材料与方法
一、材料
1.研究对象：为RF易感自然人群，年龄 9～14岁的小学生共453名，其中城市组：随访人群为城市3所小学6个班的学生共250名。男131名，女119名，年龄9～14岁，平均年龄10.24±1.27岁。共分离GAS菌株399株。农村组：随访人群为农村两间小学4个班的学生共203名。男96名，女107名，年龄 9～13岁，平均年龄10.46±0.91岁。共分离GAS菌株333株。
2.试剂：GAS标准菌株：32132A，由美国明尼苏达大学世界卫生组织链球菌参考合作中心赠送；托氏培养基：美国Difco公司；营养琼脂：日本进口分装；分组抗血清：按WHO工作手册制备［1］；胰蛋白酶：美国feinbiochemica GmBH 公司；T分型抗血清：捷克布拉格血清疫苗研究所生产。
二、方法
从1990年 5月到1991年 4月，每月每人取咽拭子1次，接种至5%的羊血平板中，置35℃温箱培养过夜，将有β-溶血环存在的菌落分离培养，然后再用兰菲法(毛细管沉淀法)进行分组，将已确定的GAS再培 养，抽提 T蛋白后进行 T分型［1］。统计学处理 T型分布率的差异采用χ2检验。
结果
1.城市与农村学龄儿童带菌者T分型分布构成：以T6(20.5%)、T4(12.0%)、T12(10.9%)多见。城市与农村之间 T型分布差异有显著性（P＜0.005）。城市组与农村组各所小学之间的T型分布差异均有显著性（P＜0.005）。
2.T分型的性别分布构成：城市或农村组男女性别的 T型分布差异均无显著性(P＞0.05)。
3.农村及城市主要T型季度分布：城市组流行最多的T6，四季皆可见，T4则多见于冬春季；农村组最为多见的T12多见于冬夏季，T11则多见于?春秋季。
讨论
GAS的M分型多达80个血清型，但并非所有型别的GAS都与风湿热/风湿性心脏病（RF/RHD）发病有关。国外经多年的研究，提出“致风湿热原性”的GAS明确有M1、3、5、6、14、18、19、24、27、29等10个血清型，其相对应的常见 T型可能为T1、T3、T5、T5/27/44、T6、T14、T9、T18、T23、T4、T27等。
M分型是经典的GAS最终分型方法。但因其型别多达80多个，兼之M蛋白容易丢失，制备M分型血清非常困难，目前世界上尚未有商品M分型血清出售，仅少数实验室掌握了该项技术。T分型技术是M分型的重要补充，尽管T分型的特异性不及M分型，但其型别少，可分辨率高，一般为90%以上，而M分型则只有50%以下［2］。T分型一般含有20多个型别，Johnson［2］总结了20年欧洲、亚洲、中东等地区25 000例GAS的血清分型，发现每个T型相对应于特定的几个M型，因而在做M分型之前，均应常规做T分型，缩小菌株M分型的范围，这样可减少M分型的次数，从而节约宝贵的M分型血清。另外，T型结合浊度因子（OF）试验，更可进一步缩窄M分型范围。
同一时期，不同国家的菌型分布和主要流行菌株存在很大差异，且同一国家不同地区亦有差异。本研究中发现农村和城市、各学校、各班之间流行的菌型分布均不同。原因是GAS可通过飞沫、唾液等方式传播。因而，同一菌型就在一个群体中流行，而在另一个群体中，则可能出现另一个菌型的流行趋势。不同的季节，菌型的流行情况亦不一样。由此可推断，不同的季节，致风湿热的菌型也不同。这与国外文献报道的结果［3,4］相符。
尽管T分型可分型率比较高，但不同地区、不同实验室GAS的T分型率均有不同。1988～1990年美国可分型率达93%，而泰国只有61%［5］。埃塞俄比亚为54.7%［3］，这可能是不可分型的菌株在此地区占主要趋势。
尽管我们不能根据有限的菌株数作出结论，但我们的结果却强调了继续对GAS进行流行病学调查的重要性，GAS的疫苗制备应根据不同地区流行状况选择备选菌株。
论文参考网
参考文献
1 Johnson DR, Kaplan EL,Sramek J, et al. Laboratory diagnosis of group A streptococcal infections. Genava: WHO, 1996, 23-32, 37-41.
2 Johnson DR,
Kaplan EL. A review of the correlation of T-agglutination patterns and M-protein typing and opacity factor production in the identification of group A streptococci. J Med Microbiol, 1993, 38: 311-315.
3 Tewodros W, Muhe L, Daniel E, et al. A one-year study of steiptococcal infections and their epidemiol. Epidemiol Infect, 1992, 109: 211-225.
4 Okuyama Y, Inoue Y, Ishihara H. Isolation trends on group A streptococci isolated from clinical specimens in hospitals in Saitama, 1979-1989. Kansenshogaku-Zasshi, 1991, 65: 928-937.
5 Kaplan EL, Johnson DR, Nanthapisud P, et al. A comparison of group A streptococcal serotypes isolated from the upper respiratory tract in the USA and Thailand: implications. Bull WHO, 1992, 70: 433-437.