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【摘要】 目的 研究并建立清脂颗粒剂的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对清脂颗粒剂中的白芍与赤芍进行定性鉴别，利用高效液相色谱法测定总芍药苷含量。结果薄层斑点清晰，阴性对照无干扰；芍药苷含量在3.6～18 μg范围内具有良好线性关系，测得清脂颗粒剂含有芍药苷57.5626 mg/g。结论该实验所建立清脂颗粒质量标准合理可行，定量定性方法专属性强，重复性好。
【关键词】 清脂颗粒； 质量控制； 芍药苷
Abstract：ObjectiveTo establish a standard for the quality control Qingzhi Granules.MethodsWhite peony root and red peony root were identified by TLC. The content of paeoniflorin in this granules was determined by HPLC. ResultsThe TLC sports developed were fairly clear,and the blank test showed no interference. The calibration curve was linear at the range of 3.6～18 mg for paeoniflorin. The WY granules contain 57.5626mg/g of paeoniflorin.ConclusionThese methods are exclusive and repeatable,which can be used as the quality control of Qingzhi Granule.
Key words：Qingzhi Granule； Quality control； Paeoniflorin
清脂颗粒由白芍、赤芍、茯苓、泽泻等6味药物组成，具有健脾化湿、活血化淤功效，用于由高血脂原因引起的动脉硬化症，治疗疗效明显。论文学术科研网按现代质量控制原则，采用薄层色谱法对制剂中白芍、赤芍进行定性鉴别，并采用高效液相色谱法对制剂中芍药苷进行含量测定。现报道如下［1～4］。
1 器材
1.1 药品制备
白芍、赤芍、泽泻、茯苓等各15g，加10倍量水煎煮两次。第1次2.0 h，第2次1.0 h。合并煎液，滤过，滤液浓缩至每毫升相当于药材2 g，加入浓缩液1～2倍量的乙醇，搅拌均匀，静置12 h，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（80℃）清膏。取清膏1份，糊精1.3份，制成颗粒，干燥，即得。
1.2 对照品
芍药苷对照品，批号10736-200527，中国药品生物制品检定所。
1.3 试剂
三氯甲烷，醋酸乙酯，甲醇，甲酸，环己烷，乙醇等，分析纯，购自天津市大茂化学试剂厂，20070419；甲醇，乙腈等，色谱纯，为天津市科密欧化学试剂公司，20070505；水是三重蒸馏水；硅胶G、羧甲基纤维素购自青岛海洋化工厂20070426。
1.4 仪器 LC-10AT型液相色谱仪泵主机（日本岛津）、SPD-10A型紫外检测器（日本岛津）；N-2000色谱工作站（浙江大学智达公司）；万分之一电子天平（美国PE公司）；SB2200-T型超声波清洗器（上海奥特赛恩斯仪器公司）。
2 方法与结果
2.1 薄层色谱鉴别白芍与赤芍取芍药苷对照品，加乙醇制成每毫升含1 mg的溶液，作为对照品溶液。取白芍、赤芍药材粉末1 g，加甲醇10 ml使溶解，超声处理30 min，取出，放冷，滤过，续滤液挥干，用1 ml乙醇溶液作为对照药材溶液。取本颗粒1 g，同法制成供试品溶液。取缺白芍、赤芍颗粒同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法实验，吸取上述3种溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿－醋酸乙酯－甲醇－甲酸（40∶5∶10∶0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃加热数分钟，斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应位置，显相同颜色斑点。阴性对照无干扰。白芍与赤芍鉴别结果。见图1。
2.2 高效液相色谱测定总芍药苷含量
2.2.1 色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：乙腈－水（13∶87）；流速0.8 ml/min；检测波长230 nm；理论板 板数按芍药苷峰计算应不低于2 000。
学术科研网 2.2.2 对照品溶液制备精密称取芍药苷对照品适量，精密称定，用稀乙醇制成每毫升含0.1 mg的溶液，为对照品溶液。
2.2.3 供试品溶液制备精密量取本品细粉1 g，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50 ml，密塞，称定重量，超声处理(功率300 W，频率50 kHz)30 min，取出，放冷，再称定重量，用稀乙醇溶解补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液滤过，取续滤液，为供试品溶液。
2.2.4 阴性对照溶液制备按处方中除白芍和赤芍，按工艺制备阴性对照颗粒，按供试品的制备方法制备阴性对照溶液。
2.2.5 空白实验
精密吸取阴性对照溶液10 μl，注入液相色谱仪中测定，结果表明其他成分对芍药苷测定无干扰。
2.2.6 线性分析
精密量取1.8 mg/ml的芍药苷对照品溶液2，4，6，8，10 μl，分别注入液相色谱仪中，测定其色谱峰面积积分值，以芍药苷对照品进样量C（μg）为横坐标，相应色谱峰面积积分值A为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程A＝227 120C+19 375，r＝0.999 4，n＝5。结果表明芍药苷对照品在3.6～18 μg范围内呈良好的线性关系。含量测定采用外标法。
2.2.7 重现性实验
精密量取1.8 mg/ml的芍药苷对照品溶液10 μl，连续进样5次，峰面积RSD＝2.395%。
2.2.8 测定法
分别精密吸取对照品溶液，供试品溶液各10 μl，分别注入液相色谱仪中，测定，即得。如图2。
3 讨论
本颗粒是由白芍、赤芍、茯苓、泽泻等6味药组成，具有健脾化湿、养血安神的功效。白芍和赤芍是该方的主药，药理及临床应用证实，白芍和赤芍的芍药苷为其主要有效成分。因此本实验研究对该方芍药苷进行鉴别和含量测定。实验结果表明，清脂颗粒中白芍与赤芍定性检出方法简单，本研究白芍与赤芍对照药材是以鉴别出药材中都含有芍药苷，说明提取方法可以把白芍和赤芍中的芍药苷提取出来，颗粒样品中也检测出芍药苷。由于白芍、赤芍中都含有芍药苷，测含量都用相同的体系检测，检测出来的是总芍药苷的含量。芍药苷的定量测定用高效液相色谱法进行，操作简便，处方中其他药材的成分对芍药苷的测定没有干扰，结果准确，专属性强，重复性好，可作为该颗粒剂质量控制使用。
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