【www.tuzhexing.com--医学类】
作者：姜丽岳 傅风华 于昕 孙芳
【摘要】 目的观察娑罗子提取物对实验小鼠胃肠道的影响。方法采用易蒙停建立小鼠便秘模型和肠蠕动抑制模型，通过鼠肠道炭末推进法测定小鼠排便和小肠推进，观察不同剂量组（3.5，7，14 mg/kg）娑罗子提取物对便秘小鼠的首次排便时间、粪便粒数、粪便重量和小肠内容物推进率的影响；采用无水乙醇造成小鼠急性胃粘膜损伤，观察娑罗子提取物各组溃疡指数、溃疡抑制率的变化。结果与模型组比较，娑罗子提取物各剂量组均能明显提高小肠推进率 (P< 0.05)，显著减少溃疡指数(P< 0.01)，低，中，高各剂量组溃疡抑制率分别达到75.2%，77.0%，72.9%；低剂量组能显著增加小鼠粪便粒数(P<0.01)和粪便重量（P<0.05）。结论娑罗子提取物对实验小鼠胃肠道具有明显的保护作用。
【关键词】 娑罗子； 便秘； 小肠推进； 溃疡指数
Abstract：ObjectiveTo study the effects of extracts from Semen Aesculi on gastric mucosa, gastrointestinal transit and constipation in mice. MethodsThe time of the first black stool, the number of stool, the weight of stool and the propulsive rate of intestines in mice were observed following the constipation induced by loperamide,and the gastric ulcer indices induced by ethanol in mice were also evaluated. Results Extracts of Semen Aesculi at low-dose increased the amount of stool granule (P<0. 01) and the weight of stool (P< 0. 05), attenuated the decreased propulsive rate of intestines(P< 0. 05), and potently inhibited ethanol-induced gastric mucosal lesions （P<0.01）. The inhibitory rates of gastric ulcers in low-dose, mid-dose, high-dose groups were 75.2%, 77.0% and 72.9%, respectively. ConclusionExtracts of Semen Aesculi have gastrointestinal protective effects.
Key words：Semen Aesculi； Constipation； The propulsive rate of intestines； Ulcer indices
胃肠道疾病是生活中的常发病，严重影响人们的生活质量。论文学术科研网便秘是临床常见病之一，中青年发病率为5%～10%，老年人发病率高达10%～40%［1］，随着日益紧张的工作压力和过分精细的饮食结构以及运动减少，其发病率越来越高。同样，随着国民生活水平的提高，大量饮酒引起急性胃黏膜损伤，近年来发病率也有增高的趋势。
中医学认为，便秘是因为情志失调、肝气郁结等原因致使肠道失于濡润，大便干结或欲便不出；大量饮酒引发的胃粘膜损伤，是由于饮食失节或偏嗜，损伤脾胃。娑罗子是七叶树科植物七叶树Aesculus chinensis Bge.，浙江七叶树Aesculus chinensis Bge. var. chekiangensis (Hu et Fang) Fang 或天师栗Aesculus wilsonii Rehd. 的干燥成熟种子。《中国药典》2005收录娑罗子的功能与主治为理气宽中、和胃止痛，用于胸腹胀闷、胃脘疼痛［2］。目前，关于娑罗子提取物的研究报道主要集中于抗渗出、增加静脉张力、消肿、抗炎以及抗氧自由基的神经保护等方面［3］。国内未见娑罗子提取物对便秘的作用及胃肠保护作用研究的报道。本文研究了娑罗子提取物对实验小鼠便秘、小肠推进的影响和由无水乙醇引起的急性胃粘膜损伤的保护作用。
1 材料
1.1 动物 昆明种小鼠，雌雄兼用 用，体重18～22 g，山东绿叶制药有限公司实验动物中心提供。动物许可证号：SYXK(鲁)20030020。
1.2 药品 娑罗子提取物，含62%七叶皂苷，山东绿叶制药有限公司；易蒙停，西安杨森制药有限公司，批号H10910085； 活性碳，国产分析纯；阿拉伯明胶，国产分析纯。5%活性碳墨汁配制：准确称取阿拉伯明胶100 g，加水800 ml，煮沸至溶液透明。称取活性碳50 g加至上述溶液中煮沸3次，待溶液冷至室温后，加水定容至1 000 ml，4℃保存，用前摇匀。
2 方法
2.1 小鼠排便实验［4］选取健康小鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组、模型组［5］和娑罗子提取物不同剂量组（3.5，7，14 mg/kg），受试药物组按0.2 ml/10 g灌胃给药，空白及模型组给予等量蒸馏水。实验小鼠持续给药5 d后，禁食16 h，其间自由饮水，至第6天，给药组和模型组分别灌胃易蒙停（4 mg/kg）造成便秘模型，空白组给予等量蒸馏水，30 min后，各组按0.2 ml/10 g给予5%活性碳。
5组动物均单只单笼观察，分别观察记录每只小鼠首次排出黑便时间和8h内排出黑便粒数及总重量。
2.2 小肠推进实验［4］ 选取健康昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组、模型组和娑罗子提取物低、中、高剂量组（3.5，7，14 mg/kg），灌胃给药1 h后，除空白组外均给予易蒙停（4 mg/kg）制作模型，30 min后给予活性碳，15 min后颈椎脱臼处死小鼠，打开腹腔分离肠系膜，剪取小肠，测量炭末推进距离，计算小肠推进率（%）。
推进率（%）=活性碳推进长度/cm小肠总长度/cm×100%
2.3 对无水乙醇所致小鼠胃溃疡的影响选取健康昆明种小鼠50只，雌雄各半，随机分为5组：模型组、雷尼替丁组(40 mg/kg)、娑罗子提取物低、中、高剂量组(3.5，7，14 mg/kg)。各组持续灌胃给药5 d。第4天给药后禁食不禁水24 h。末次给药后1 h，将禁食小鼠灌服无水乙醇，0.2 ml/只，1 h后处死动物。取胃，结扎胃贲门和幽门，并向胃腔内注入10%福尔马林溶液2 ml，然后，将胃浸入10%福尔马林溶液，30 min后沿胃大弯剖开，冲去胃内容物，解剖显微镜下观察胃黏膜损伤并计算胃溃疡指数。
溃疡指数(Ulcer Index, U I)和抑制率的计算：按Guth标准计算溃疡指数和抑制率［6］。展平的胃壁按溃疡或糜烂面积大小给予计分，①每3个点状溃疡(黏膜缺损小于1 mm或出血性糜烂小点，称点状溃疡)计1分；②条状出血：以刻度目镜观测溃疡面的最大长径和垂直于最大长径的最大宽径，二者的乘积即为溃疡指数。宽为1 mm者每毫米长为1分；2 mm 宽者每毫米长为2 分；3 mm 宽者每毫米长为3分。
溃疡抑制率（%）=模型组平均UI-实验平均UI模型组平均UI×100%
2.4 统计分析所有实验结果均以±s表示，以t检验进行组间统计学差异比较，以P<0.05为差异具有统计学意义。
学术科研网
3 结果
3.1 娑罗子提取物对小鼠便秘实验影响与正常对照组动物比较，模型动物首次排便时间延长，排便粒数减少。与模型组小鼠比较，低剂量组小鼠排便粒数增多，排便重量增大（P<0.01），首次排黑便时间缩短；中、高剂量组无明显差别。结果见表1。表1 娑罗子提取物对便秘小鼠排便的影响
与模型组比较，*P <0.05，**P <0.01；与空白对照组比较， ＃＃P< 0.01；n=10
3.2 娑罗子提取物对小鼠小肠推进的影响与正常对照组动物比较，模型动物小肠推进率明显降低。各受试药组与模型组比较，均有明显促进小肠炭末推进的作用（P<0.05）。结果见表2。表2 娑罗子提取物对小鼠小肠推进的影响与模型组比较，*P<0.05；与空白对照组比较，＃＃ P<0.01； n=10
3.3 娑罗子提取物对无水乙醇致小鼠胃黏膜损伤的影响 灌胃给予1 ml无水乙醇1 h后， 模型组小鼠胃黏膜出现明显的出血性溃疡， 娑罗子提取物低、中、高剂量均可显著减少溃疡指数（P <0.01），溃疡抑制率高达70％以上，抑制作用未随剂量增加而增大。结果见表3。表3 娑罗子提取物对乙醇致小鼠胃粘膜损伤的影响
4 讨论
易蒙停（盐酸洛哌丁胺）与吗啡相似，能明显抑制肠蠕动而止泻，现已成为广泛有效的非特异性止泻药。本实验采用易 蒙停造成小鼠便秘模型和肠蠕动抑制模型。
通过观察便秘小鼠的首次排便时间、粪便粒数、粪便重量、小肠内容物推进率、急性胃黏膜损伤小鼠的溃疡指数和溃疡抑制率，我们发现，娑罗子提取物明显具有促进小鼠肠蠕动，对无水乙醇引起的小鼠胃黏膜损伤具有很好的保护作用，其胃黏膜保护作用未表现出剂量效应关系，且在低剂量作用就十分显著，说明其具有很强的黏膜保护效应。这些结果为娑罗子中医经典功效“理气宽中，和胃止痛，用于胸腹胀闷，胃脘疼痛”提供了理论依据。
抑制胃酸分泌，是目前临床治疗胃溃疡的一种主要思路和手段。雷尼替丁，是一种选择性的H2受体拮抗药，能有效地抑制胃酸分泌而治疗胃溃疡。但本实验中未显示出黏膜保护作用，可能与本实验模型采取乙醇直接损伤胃黏膜有关。在本实验中，娑罗子提取物各剂量对小鼠的溃疡抑制率明显高于雷尼替丁。这与国外有关文献报道的其他含有七叶皂苷提取物的研究结果相似，Hisashi Matsuda等提出，娑罗子提取物中的七叶皂苷对乙醇所致胃黏膜损伤的保护作用是非抑制胃酸依赖的［6］。本文小肠推进的实验中，娑罗子提取物各剂量组药效作用效果相当，无明显量效关系。而在便秘实验中，低剂量组作用效果明显优于中、高剂量组，由此推测，娑罗子提取物促进小肠推进仅是其影响小鼠便秘的一条途径，还可能通过其它途径，发挥其作用。有研究报道，娑罗子提取物中的七叶皂苷Ib能刺激5-HT系统中的5-HT2， 也可能是 5-HT2A 受体［7］，进而促进内源性PGs和NO的释放［8，9］，改善微循环等，达到胃肠道保护作用。
娑罗子提取物对胃肠推动作用和胃黏膜保护，以及低剂量效应明显的机制有待于进一步研究。
【参考文献】
［1］ 阚志超，姚宏昌，龙治平，等.天津市成年人慢性便秘调查及相关因素分析［J］.中华消化杂志，2004，24（10）：612.
［2］ 国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：206.
［3］ 侯广平.七叶皂苷钠的主要临床应用研究现状［J］.中国药师，2006，9（1）： 57.
［4］ 陈 奇.中药药理研究方法学［M］.北京：人民卫生出版社，1993：331.
［5］ Saito T. Laxative and anti-diarrheal activity of polycarbophil in mice and rats［J］.JPn J Pharmacol, 2002, 89(2): 133.
［6］ Guth PH, Aures D, Panlsen G. Topica aspirin plus HCl gastric lesions in the rat ［J］.Gastroedterology, 1979, 76 (1): 88.
［7］ Matsuda H, Li Y, Yoshikawa M. Possible involvement of 5-HT and 5-HT2 receptors in acceleration of gastrointestinal transit by escin Ib in mice［J］.Life Sci , 2000, 66(23): 2233.
［8］ Matsuda H, Li Y, Yoshikawa M. Gastroprotections of escins Ia, Ib, IIa, and IIb on ethanol-induced gastric mucosal lesions in rats［J］. European Journal of Pharmacology, 1999, 373: 63.
［9］ Matsuda H, Li Y, Yoshikawa M. Roles of endogenous Prostaglandins and nitric oxide in inhibitions of gastric emptying and accelerations of gastrointestinal transit by escins Ia, Ib, IIa, and IIb in mice［J］.Life Sci , 2000, 66(3):41.