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作者：张泽楷 陈建荣 张明时 康福星 陈文生
【摘要】 目的建立毛细管气相色谱法测定头花蓼中8种有机氯农药残留量的方法。方法样品经有机溶剂超声提取，硫酸净化；采用OV-1701（30 m×0.32 mm×0.32 μm）毛细管柱，恒定温度，电子捕获检测器,外标法计算含量。结果样品的平均回收率为81.1%～105.8% ,RSD为1.75%～5.12%；所测定样品中有机氯农药残留量均低于相关标准。结论该方法快速、简便、准确，可快速测定头花蓼中有机氯农药残留量。
【关键词】 恒温； 气相色谱法； 头花蓼； 有机氯农药残留
Abstract：ObjectiveTo determine 8 organochlorine pesticides (OCPs) in Polygonum capitatum by capillary gas chromatography with electronic capture detector (CGC-ECD) .MethodsSamples were extracted with organic solvent using supersonic fluid extraction. The extracts were cleared up by concentrated H2SO4，the column was OV-1701（30 m×0.32 mm×0.32 μm） with constant temperature .The pesticide residues were calculated by external standard method. ResultsThe average recoveries and RSD ranged from 81.1%～105.8% and 1.75%～5.12% respectively.The OCPs of the Polygonum capitatum were lower than the corresponding standards.ConclusionThis method is rapid,simple and accurate. It can be used to determine organochlorine pesticides in Polygonum capitatum rapidly.
Key words： Constant temperature； Gas chromatography； Polygonum capitatum； Organochlorine pesticides residue
有机氯类农药是杀虫剂中使用最广泛的一大类。论文学术科研网其代表是六六六(BHC) 和滴滴涕(DDT) , 这类农药化学性质稳定，脂溶性大,长期存在于水、土壤之中,并通过生物链富集在动植物体内,对自然环境和人体健康造成极大危害 。世界各国已于20世纪80年代初禁止使用此类农药，但目前仍然能在中药材中检出该类农药成分［1，2］，中药材普遍存在有机氯农药残留问题。苗药头花蓼是贵州省根据地方优势资源开发的新品种，在治疗妇科疑难杂症、中老年人肠胃疾病、泌尿系统感染等方面具有显著疗效。近年来，有关有机氯农药残留的测定都采用气相色谱法-程序升温［3～5］，出峰时间大都在17～30 min左右。本文首次采用恒温-气相色谱法对头花蓼中有机氯农药残留量进行测定，8种有机氯农药在9 min内全部出峰，相邻色谱峰之间分离度均大于1.5 ，大大缩短了分析测试时间，建立了中药材有机氯农药残留测定的新方法，且方法回收率、精密度及重复性实验结果均符合农药分析的要求［6］,为中药材达到安全,可控之质量标准提供了科学依据。
1 器材与试剂
Agilent 6890N 气相色谱仪，配备电子捕获检测器（μ—ECD），安捷伦GC工作站；OV-1701毛细管柱（30m×0.32 mm×0.32μm）；旋转蒸发仪R210(瑞士BUCHI公司)；SHZ—III型循环水真空泵(上海亚荣生化仪器厂)；H66MC超声波发生器（无锡市超声电子设备厂）；8000型离心机(金坛市大地自动化仪器厂)。
试剂：丙酮、正己烷为色谱纯（天津科密欧）；二氯甲烷为分析纯（天津科密欧）；石油醚（60～90℃，天津科密欧 分析纯）；无水硫酸钠（分析纯，研细350℃烘4 h，北京化工厂）；浓硫酸(分析纯)；水为重蒸馏水。
农药标准品:α-六六六(α-BHC)、β-六六六(β-BHC) 、γ-六六六(γ-BHC)
) 、δ-六六六(δ-BHC)、PP ’-滴滴伊(PP’-DDE) 、OP""""- 滴滴涕(OP’-DDT) 、PP’-滴滴滴(PP’-DDD)、PP’-滴滴涕(PP’-DDT) (以上标准品均由农业部环境保护科研监测所研制,浓度均为100 μg?ml-1) 。
头花蓼样品共6个,采集于贵州省黔东南苗族侗族自治州的头花蓼药材种植基地，样品编号（070801，070802，070803，070804，070805，070806）。
2 方法
2.1 色谱条件采用Agilent 6890N 气相色谱仪，配备捕获检测器（μ-ECD），安捷伦GC工作站；自制OV-1701毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.32 μm），进样口温度:280℃ 柱温：240℃恒定温度,检测器温度320℃，压力11.45psi，流速1.5 ml/min，载气为高纯氮气（＞99.99%）；进样量1 μl，不分流进样。以保留时间定性，外标法峰面积定量。混合标准对照品和样品色谱图见图1。
2.2 标准曲线绘制
2.2.1 混合对照品储备液的制备分别精密吸取α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC、PP’-DDE、OP’-DDT、 PP’-DDD、PP’-DDT (均为100 μg?ml-1) 0.5 ml,置于10 ml量瓶中,石油醚定容至刻度,使混合农药对照品浓度为5 μg?ml-1。
2.2.2 混合对照品溶液的制备分别精密吸取一定体积的上述混合对照品储备液于50 ml量瓶中,用石油醚稀释,得到0.01，0.02，0.05，0.1，0.2，0.5，1.0μg?ml-1的一系列不同浓度的混合对照品溶液。按“2.1”项条件下测定。以峰面积为纵坐标（Y）,浓度为横坐标(X),计算线性方程,结果见表1。结果表明在10～1 000 μg?L-1内呈良好线性关系。
图1 8种有机氯农药对照品和头花蓼色谱图（略）
表1 有机氯农药的线性方程和相关系数（略）
2.3 供试品溶液制备样品于60℃干燥4 h ,粉碎,过40目筛。精密称取2.0 g 置于100 ml 具塞锥形瓶中, 加入20 ml蒸馏水浸泡过夜,精密加入40 ml丙酮,超声30 min , 再加入约6 g 氯化钠并精密加入30 ml二氯甲烷,超声15 min ,静置使其分层,将有机相移入装有无水硫酸钠(适量) 的100 ml 具塞锥形瓶中,脱水4 h 。精密量取35 ml有机相置于旋转蒸发瓶中,于40 ℃水浴减压浓缩至近干,用适量正己烷多次溶解并转移至10 ml 具塞刻度离心管中, 精密定容至5.0 ml。加入1.0 ml浓硫酸,振摇1 min ,离心(3 000 r?min-1) 10 min。精密量取2.0 ml 上清液至K-D瓶中,40℃下浓缩并定容置1.0 ml,备用。
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3 结果
3.1 精密度实验吸取同一浓度的有机氯对照品溶液，进样量1ul,重复进样5 次，按“2.1”条件操作得：α-BHC、β-BHC 、γ-BHC、δ-BHC、PP’-DDE 、OP’-DDT、PP’-DDD、PP’-DDT 的RSD(%) 分别为2.45，4.15，4.79，3.95，2.57，3.10，3.19，4.38。
3.2 重复性实验准确称取样品5份(每份2 g) ,按“2.3”项方法处理,按“2.1”项条件测定,各农药的RSD(%) 分别为2.85，3.36，3.19，2.98，5.02，4.51，4.07，4.74。
3.3 回收率实验及检出限测定称取样品9 份,分3个水平添加混合标准品，每水平3 份, 按“2.3”项方法处理,按“2.1”项条件测定，回收率和相对标准偏差结果见表2。以2倍噪音计算方法的检出限，8种有机氯农药检出限分别为（按出峰顺序）：0.000 07，0.000 09，0.000 18，0.000 12，0.000 18，0.000 67，0.000 28，0.001 31（mg?kg-1）。
3.4 样品的测定按照上述方法操作，计算得6个样品中有机氯农药的含量见表3。
4 讨论
本实验采用Agilent 6890N 气相色谱仪，OV-1701石英毛细管柱（30 m×0.32 mm×0.32 μm），240℃恒定温度。8种有机氯农药残留在9 min内全部出峰，峰分离度好，且回收率、精密度及重现性实验结果均符合农药分析的要求。节省了样品的检测时间，建立了中药材有机氯农药
残留快速测定的新方法。
表2 有机氯农药的回收率和相对标准偏差（略）
表3 样品中有机氯农药的含量（略）
“-”表示未检出或低于方法检出限
本实验测定了6个批号的头花蓼，发现其机氯农药的残留量含量均较低，均未超过《药用植物绿色行业标准》，同时说明贵州省实行中药材GAP生产基地后,药材中有机氯农药残留量在逐步下降。
国家把“中药现代化”列为“十五”国民经济发展中的高新技术产业之一，并制定了与中药生产和管理有关的法规、标准。因此，实行中药现代化，建立绿色中药材GAP生产基地，同时必须建立符合科学技术发展水平的中药标准规范体系。农药残留问题需要有关部门和专家学者们的重视,加大研究力度 ,使中药为人类防病、治病发挥更大的作用。
【参考文献】
［1］ 韩桂如，陈太平，杨建红，等.中药中有机氯农药残留量的研究［J］.中国中药杂志，1996, 21(10):591.
［2］ 张曙明，郭怀忠，陈建民.黄芪、三七和西洋参中多种有机氯农药残留量分析［J］.中国中药杂志，2000，25(7)：402.
［3］ 沈 燕，许文祥.气相色谱法测定部分中药中有机氯类农药残留量［J］.中成药，2006，28（3）：406.
［4］ 李玲玲, 袁文杰, 张水龙，等.进口药材西洋参、番泻叶中有机氯类农药残留量分析［J］.中草药，2003，34（7）：610.
［5］ 薛 健，张 琪，张国良，等.枇杷叶中农药残留量测定研究［J］.中国中药杂志，2001，26(10)：680.
［6］ 樊德方. 农药残留量分析与检测［M］.上海:上海科学技术出版社,1982：116.