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作者：李学坚，邓家刚，覃振林，廖冬燕，陆晓妮
【摘要】 目的观察芒果苷小檗碱组合物（MMB）的抑菌、抗炎、镇痛作用。方法采用液体试管二倍稀释法进行抑菌实验，采用大鼠实验性子宫炎症模型进行抗炎实验，采用醋酸所致小鼠扭体试验进行镇痛研究。结果MMB对福氏志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌以及大鼠实验性子宫炎症具有明显的抑制作用，且能减少腹腔注射醋酸所致小鼠扭体次数。结论MMB有良好的抑菌、抗炎、镇痛作用。
【关键词】 芒果苷小檗碱； 子宫炎； 抑菌； 镇痛； 药理作用
Abstract：ObjectiveTo study the anti-bacterial，anti-inflammatory and analgesic activities of the mixture of mangiferin and berberine (MMB). MethodsAnti-bacterial activity was test in tubes in which the liquid was diluted to double volume every time；anti-inflammatory activity was tested by a rat model with uterine inflammation；analgesic activity was tested by observing the writhing response caused by acetic acid. ResultsMMB had inhibitory effect on a variety of bacteria，on rat uterine inflammation and could reduce the writhing times caused by acetic acid. ConclusionMMB has anti-bacterial，anti-inflammatory and analgesic activities.
Key words：Mangiferin； Berberine； Anti-bacteria； Anti-inflammation； Analgesic activity
小檗碱berberine又称黄连素，有广泛的药理作用［1］，易溶于水，但其盐类在水中的溶解度都比较小，如盐酸盐为1∶500，硫酸盐为1∶30。论文学术科研网芒果苷(mangiferin)是芒果叶、扁桃叶、知母等中药材的有效成分，不溶于水，文献［2］报道其具有止咳化痰平喘、抗炎、镇痛等作用。作者将芒果苷和盐酸小檗碱在一定条件下进行混合复配，分子以1∶1的比例通过范德华力结合，大大增加了两者的水溶性［3］。本实验首次采用动物模型对芒果苷小檗碱组合物(Mixture of Mangiferin and Berberine，MMB)的抑菌、抗炎、镇痛作用进行研究。现报道如下。
1 材料与仪器
1.1 药物及试剂MMB水溶液：自制，浓度为 25 mg/ml，批号20070604；阳性对照药：妇炎康片，湖南湘泉制药有限公司生产，批号20070103011；阿司匹林片，武汉远大制药集团股份有限公司生产，批号061209。
1.2 动物昆明种小鼠，18～22 g，雌雄兼用，普通级，广西中医学院实验动物中心提供，合格证：桂医动字第11004号。Wistar大鼠，200～300 g，雌性，广西中医学院实验动物中心提供，合格证：桂医动字第11005号。动物分性别饲养于空调室内，室温（22±2）℃，相对湿度60%±5%，喂标准颗粒饲料，自由饮水和摄食。
1.3 仪器FA1004型万分之一电子天平，上海精密科学仪器有限公司生产。
1.4 统计学方法采用PEMS3.1统计软件分析数据，结果以均数±标准差表示，作组间t检验。
2 方法与结果
2.1 抑菌实验取MMB原液，115℃高压灭菌20 min，备用。采用液体试管二倍稀释法，用营养肉汤培养基、改良马丁培养基将供试液作系列稀释，使药液浓度为1∶2，1∶4，1∶8，1∶16，1∶32，1∶64，1∶128，1∶256，1∶512，1∶102 4，分装试管，每管1.0 ml，第11管作为阳性对照，第12管作为阴性对照。除阴性对照管外，每管接种100 000 CFU/ml菌液0.1 ml，接种的菌种见表1。细菌置35～37℃培养24 h，真菌置25～28℃培养36 h，而后将各管培养物 物分别接种于不含药物的琼脂培养基平板上，细菌置35～37℃培养24 h，真菌置25～28℃培养36 h，以生长菌落不超过5个者为MMB的最小抑菌浓度（MIC），结果见表1。MMB对大肠杆菌、乙型副伤寒沙门菌、福氏志贺氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的MIC分别为：12.5，12.5，3.12，12.5，1.56，0.78，0.19，0.39 mg/ml。结果表明，MMB的抑菌浓度均较低，但也有区别：对大肠杆菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单胞菌的抑菌浓度较大；对福氏志贺氏菌、金黄色葡萄球菌的抑菌浓度中等；对枯草芽孢杆菌、表皮葡萄球菌、白色念珠菌的抑菌浓度最小；说明MMB有显著的广谱抑菌作用。
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表1 体外抑菌实验结果（略）
2.2 对大鼠实验性子宫炎症的影响［4］取体重200～300 g雌性Wistar大鼠40只，随机分为空白对照组，妇炎康组(阳性药，0.78 g／kg)，MMB大、小剂量组（0.13 g/kg，0.065 g/kg）。在乙醚麻醉下，剪去大鼠腹毛，消毒皮肤，切开腹部暴露子宫，在左侧子宫角上l cm处切小口，将一塑料管（管径2 mm，长0.5 mm，重2 mg，用前消毒）置于子宫内缝合固定以防止脱落，并将子宫切口缝合，为防止感染，滴入浓度为0.1mg/ml的青霉素液 0.2 ml，而后将腹腔分层缝合。术后2 h各组分别灌胃给药，连续7d，处死动物，取出两侧子宫，用微量组织天平称重，左侧子宫在计算前?先减去塑料管重量2 mg，计算肿胀率和抑制率，计算公式如下：
肿胀率（％）=(W2-W1)／W1×100％，其中：W1，W2分别代表未致炎和致炎子宫重量
抑制率（％）=(S2-S1)／S2×100％，其中：S1，S2分别代表给药组和对照组的肿胀率
结果见表2，与空白对照组比较，MMB大剂量组和阳性药妇炎康组均能明显降低子宫异物所致炎症的肿胀率，MMB小剂量组也有一定作用但不明显，提示MMB具有抗炎作用。
表2 对子宫异物所致炎症肿胀的影响（略）
与空白对照组比较，1）P<0.05；n=10
2.3 对醋酸所致小鼠扭体反应的影响［5］取体重18～22 g昆明种小鼠40只，随机分为空白对照组，阿司匹林组（0.2 g/kg），MMB大、小剂量组（0.30，0.15 g/kg）。分别连续给药10 d，1次/d，空白对照组给予等体积蒸馏水。于末次给药后40 min，各鼠腹腔注射0.6％醋酸溶液0.2 ml，记录注射醋酸溶液后20 min内各鼠的扭体次数，结果见表3。与对照组比较，MMB大、小剂量组和阿斯匹林组均能显著减少小鼠扭体次数，提示有明显的镇痛作用。
3 讨论
研究结果表明，MMB对福氏志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌等妇科致病菌具有明显的抑制作用；连续灌胃给药，MMB能明显抑制大鼠实验性子宫炎症模型的炎症、减少醋酸所致小鼠扭体次数，提示MMB具有显著的抑菌、抗炎、镇痛作用。
表3 对小鼠的镇痛作用（略）
与空白对照组比较，1)P<0.001;n=10
MMB由芒果苷和盐酸小檗碱复配而成，文献报道芒果苷和小檗碱均具有一定的抗炎、抑菌、镇痛作用［1，2］，MMB也表现出了相应的药理作用，且呈一定的量效关系和协同效应。
MMB解决了芒果苷不溶于水的难题，同时增加了盐酸小檗碱的水溶性，且表现出良好的药理作用，提示MMB是一种具有良好开发前景的治疗妇科炎症的中药复方。
【参考文献】
［1］ 崔学军．小檗碱的药理学研究进展及临床新用途［J］.时珍国医国药，2006，17(7)：1311.
［2］ 邓家刚，曾春晖．芒果叶及芒果苷30年研究概况［J］.广西中医学院学报，2003，6(2):45.
［3］ 李学坚，邓家刚．芒果苷小檗碱组合物［P］.中国发明专利，200710126143.7.
［4］ 何晓红，刘 威，张晓宇．金赤苓胶囊药效学实验研究［J］.中国中医药科技，2005，12(6)：357.
［5］ 封士兰．山生柳的抗炎镇痛作用［J］.中药药理与临床，2001，17(2)：17.