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【摘要】 目的优选黄芪的最佳微波提取工艺。方法采用正交实验法。以干膏收率、多糖含量、黄芪甲苷含量为指标，对影响提取的因素进行考察。结果最佳微波提取工艺为提取时间25 min，功率480 W，提取1次，料液比1∶12(g∶ml)。结论通过重复验证实验表明优选出的工艺科学、经济，可有效节约资源，指导工业生产。论文论文参考网
【关键词】 黄芪；多糖；总皂苷；正交实验；综合评分
Abstract：ObjectiveTo optimize the extraction technique for Radix Astragali. MethodsConditions for the extraction were studied by orthogonal experimental design with the dried water decocting rate and the contents of astragaloside and polyscaccharide in the extract as indexes. ResultsThe best technological conditions of the microwave extraction were using 20min, 480 W firepower, one time and the ratio of material to liquid was 1:12. ConclusionThe optimal craft was indicated to be scientific and economic by repeated experiment, and it can be used to save resources and instruct industrial practice.
Key words：Radix Astragali；Polysaccharide； Total saponins；Orthogonal experimental； Synthetical mark
黄芪(Radixa Astragali)为豆科植物膜荚黄芪Astragalus mebrananceus (Fisch.) Bge.和蒙古黄芪A. mongholicus (Bge.) Hsiao.的干燥根，主要分布于我国西北、华北和东北等地区，其主要活性成分为黄芪多糖和黄芪甲苷(皂苷类)，具有补气固表、托毒排脓、生肌、利尿的功效。目前制剂生产中大多采用直接水煎煮提取，具有耗时长、收率低、杂质多等缺点。本实验采用微波提取正交实验法，以干膏收率、黄芪甲苷和多糖含量为指标，采用综合评分法对黄芪的微波提取工艺进行了优选。
1 仪器与试药
TU-1221型紫外分光光度计（北京惠普通用仪器公司）；WD800G型微波炉（佛山市顺德微波炉电器有限公司）；KS-120E型超声波清洗机（宁波生科仪器厂）；SHH421-420型恒温水浴锅（河北省黄骅市航天仪器厂），FA2004N型电子天平（上海天平仪器厂）。中药黄芪（购自陕西汉中药材公司），黄芪甲苷对照品（中国药品生物制品检定所，标号0781-20008），葡萄糖(AR，上海化学试剂厂)，试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 正交实验
设计选择提取时间、提取次数、料液比、微波功率为考察因素，每因素各取3个水平，选用L9(34)正交表进行实验，以干膏收率、多糖含量及黄芪甲苷含量为评价指标，采用综合评分法进行数据分析(其权重系数分别为0.1，0.5，0.4)［1］。正交实验因素水平见表1。
2.2 样品溶液的制备
称取9份黄芪药材粉末（过40目筛），每份10 g，按正交表各列号项下条件分别进行微波提取，滤过，滤液合并，离心，取上清液，加水定容于100 ml量瓶中，备用。
2.3 干膏收率实验
精密量取9份样品溶液各25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，残渣于105℃干燥3 h，取出，置干燥器中放置30 min后迅速称重，计算。结果见表2。表1因素水平表（略）
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2.4 样品中多糖的含量测定
2.4.1 标准曲线的制备
分别精密吸取对照品溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，用蒸馏水补足2 ml，摇匀。分别加入6 %苯酚液［将苯酚置蒸馏瓶中蒸馏，收集（180±2） ℃时的馏分；精密称取15 mg苯酚馏分溶解定容于250 ml棕色容量瓶中，于 于4℃冷藏备用］，摇匀；再各加入浓硫酸5 ml，摇匀。室温放置40 min，用未加对照品的溶液作空白对照，在488 nm处测定。以吸收度值A为纵坐标，浓度C（μg/ml）为横坐标进行线性回归，得方程：A=16.51C+0.002 3，r=0.999 6 （n=6）；线性范围为10～50 μg/ml。
2.4.2 多糖含量测定［2］
结果见表2。表2 正交实验方案及结果（略）
2.5 样品中皂苷含量的测定
2.5.1 标准曲线的制备
分别精密吸取对照品溶液0，0.6，0.8，1.0，1.2，1.4，1.6 ml于量瓶中，水浴加热挥去溶剂，各加入0.20 ml 5 %香草醛冰醋酸溶液和0.80 ml高氯酸，密塞，于70℃水浴恒温加热20 min，取出后立即用流水冷却，加冰醋酸5 ml摇匀，显色。用未加对照品的溶液作空白对照，在540 nm处测定。 以吸收度值A为纵坐标，黄芪甲苷量C（μg）为横坐标进行线性回归，得方程：A=487.805C-7.317，r=0.999 4 （n=6）。表明黄芪甲苷在120～320 μg范围内有良好的线性关系。
2.5.2 黄芪甲苷含量测定［3］结果见表2。
2.6 结果分析
表2表明，微波提取实验中根据极差大小得出各因素作用主次为A>C>D>B，最佳工艺组合为A3B1C3D1。表3 表明，A因素对提取效果的影响有显著意义，B、D两因素对提取效果的影响也有显著意义。在实验范围内，料液比的影响最小。表3 综合评分方差分析（略）
2.7 验证实验
为验证上述优选的微波提取工艺最佳条件的稳定性，称取20 g黄芪3份，分别按所确定的最佳条件进行提取，测得结果如表4。表4 验证实验结果（略）
3 讨论
黄芪多糖和皂苷为黄芪中主要有效成分。目前制剂生产中其提取方式大多采用直接水煎煮提取，且文献多报道单独提取黄芪多糖或皂苷。本实验将微波技术应用于植物细胞破壁，有效提高了收率，克服了以往收率低、耗时长、成本高等缺点，为较理想的提取方法。同时在正交方案中优选多种指标成分，以节约药品用量，降低能量得到最大产率为原则，重复验证实验表明优选出的工艺科学、经济，可用于指导制剂及工业生产。
【参考文献】
［1］罗毅,刘刚,周本宏,等.综合评分法优选黄芪的水煎提工艺［J］.中国医院药学杂志, 2004, 24 (11):667.
［2］国家药典委员会.中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：64.
［3］姚丽娜,林政义,陈 芳.不同种类黄芪的皂苷含量比较［J］.淮海医药,2005,23(2):108.