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［摘 要］ 随着科学技术的日新月异，尿液有形成分的临床检验方法发生了根本性的变化。从过去简单的目测颜色、性状到显微镜检查高倍估计,从干化学的初筛检验到尿液流式细胞仪全自动分析,大大提高了尿液检验速度,而且为尿液有形成分检验标准化奠定了基础。本文就近年来国内尿液有形成分检验中传统显微镜检查和现代干化学分析与流式全自动分析检验的结合在临床上的应用作一综述。
［关键词］ 尿液；有形成分；显微镜检查；尿干化学；尿流式分析
1 尿液有形成分检测的意义
在尿液形成过程中，泌尿道常有组织的脱落物和细胞渗出，尿离体离心或自行沉降，其沉降物称为尿沉渣,是尿液中的有形成分，包括细胞、管型、细菌、霉菌、结晶、药物等。尿沉渣检查是尿液分析的重要组成部分，以往直接将尿离心，取沉渣在显微镜下检查，称为“尿沉渣检查”［1］，而目前开展的流式原理自动化检查方法，无需离心即可直接分析尿中有形成分，称为尿有形成分分析［2］。近年来强调分析尿中所有颗粒，即细胞、管型、细菌、霉菌、结晶、药物等。尿液有形成分分析可确定进入尿路中的细胞种类，如红细胞增多常提示尿路出血，进一步检查红细胞形态则有助于确定血尿来源；白细胞增多则提示尿路感染；不同尿路上皮细胞增多有助于判断各种尿路病变部位。管型增多则提示肾小球肾炎、肾小管(远端，集合管病变)及肾功能减退，所以说尿液有形成分分析可反映泌尿系统各部位的变化，协助对泌尿系统疾病进行诊断、定位、鉴别及预后判断等，为泌尿系统疾病诊断提供可靠依据。难怪有人称尿沉渣检查为“体外无创性肾活检”［3］。
2 传统尿液有形成分的检验
尿液有形成分分析有多种方法，而目前临床常用的包括显微镜检查法、干化学方法和流式细胞法。传统的离心后显微镜检查法,即取混匀的新鲜尿液10 ml于一刻度管内，用回转半径15 cm的水平离心机以1 500 r/ min(RCF=378 G)沉淀5 min，取出离心管倾去上层液体使剩约0.2 ml，混匀管底沉淀物，用吸管吸出沉淀物的20 μl，滴于载玻片上，用盖玻片覆盖后镜检。先用低倍镜(10×10倍)观察全片，再用高倍镜(10×40倍)仔细观察，细胞以高倍镜所见最低和最高数字表示，管型以低倍镜所见最低和最高数字表示［4］。这种传统方法受操作者主观影响误差较大，重复性差，判断不标准，不易定量，报告结果不利于临床动态观察，是缺乏标准化的实验方法。
3 干化学对尿液有形成分的初筛
20世纪80年代,90年代临床上大量使用干化学分析仪方法,尿干化学分析仪对尿中红细胞、白细胞检测是应用化学方法进行的。对尿中白细胞的测定是基于中性粒细胞胞浆内含有酯酶，可催化吲哚酚酯分解出吲哚酚，后者再与重氮盐反应呈现紫色复合物，其颜色深浅与细胞多少呈比例关系，但淋巴细胞不含酯酶，则不与淋巴细胞发生反应。此外高比重尿，尿中含有头孢霉素、庆大霉素、四环素、硼酸、草酸也可致假阴性。尿中含有里甲醛、呋喃坦啶及大量胆红素，氧化型清洁剂则可致假阴性。尿干化学分析仪对红细胞测定是利用血红蛋白(Hb)具有过氧化氢酶样活性，可使过氧化氢茴香素或过氧化氢稀枯分解出［O］，后者能氧化色原使其显色，它既可测完整HBC，也可测游离Hb，此法最大问题是受易热酶干扰。在尿液中常存在类过氧化酶性的物质，其具有Hb相同的氧化色原的作用，造成红细胞结果偏高或出现假阳性。对尿中细菌的检测主要基于尿液中细菌能产生的亚硝酸盐含量，只有尿中致病菌含有硝酸盐还原酶时，且尿中含有适量硝酸盐，允许细菌与尿液充分作用(在膀胱停留间隔＞４ h)，否则试验将出现假阴性［5］。干化学分析仪灵敏度较高，相对特异性较差，假阳性较多，只能作为患者诊断的初筛，不能作为确诊的依据。干化学分析对尿中红白细胞的检查不能代替显微镜，大量的临床试验证明,只有在干化学结果尿蛋白，尿亚硝酸盐，尿白细胞(WBC)，尿RBC结果均为阴性且尿液来自非泌尿系疾病患者，才可视为尿液中的RBC，WBC数量在参考范围内可免于镜检［6］。尿有形成分分析是尿常规检验的核心，具有非常重要的临床价值，而要获得有价值的实验资料，就必须实行标准化、规范化的尿沉渣检查。
4 尿液有形成分的标准化建议及参考值
中华医学检验分会于2002年出台了：“尿沉渣检验标准化建议”［7］。建议对材料和器械、标本的收集及运送，尿沉渣检验的操作步骤，应报告的尿沉渣内容等均进行明确规定。如容器、离心管、尿沉渣计数板、离心机(水平式)相对离心力在400 g左右，显微镜则要求有内置光源，光线强度可调，应具备40倍、10倍的物镜和10倍的目镜，并对标本运送，标本接收均作了明确规定。添置K0Va板或Fast??Read??10即可完成。由 由于操作统一，结果准确，报告一致，是值得推荐的尿沉渣检查法。国内丛玉隆应用一次性计数板标准镜检法对国内6座城市,9家医院,3 757例健康人随机中段尿定量计数,发现红细胞：男性0/μl～4/μl(儿童),0/μl～4.5/μl(成人),女性0/μl～6/μl(儿童),0/μl～7/μl(成人);白细胞：男性0/μl～3/μl(儿童),0/μl～6/μl(成人)，女性0/μl～4/μl(儿童),0/μl～14/μl(成人)，上皮细胞：男性0/μl～2.5/μl(儿童),0/μl～3.25/μl(成人),女性0/μl～3.8/μl(儿童)0/μl～28.0/μl(成人)［8］，该结果为尿有形成分检查规范化、标准化推广和临床应用提供了依据。我国但目前实际条件下，实验室人员少，工作量大，要使用规范的镜检步骤准确、及时地发出报告是比较困难的。最好寻找一个简单的、快捷的方法进行过筛，即将完全正常的标本筛去后，对异常标本进行规范性检查是可行的。
5 尿流式对尿液有形成分的检验
随着自动化仪器的应用，为尿有形成分定量提供了新的方法。Sysmex公司生产的UF-50,UF-100尿液分析仪是根据流式细胞术设计的专门用于尿沉渣检查的仪器。该仪器所用尿液不用离心，经荧光染色后，应用鞘流技术将尿中有形成分单个有序通过检测系统。根据检测后发出的荧光强度和在前向角测定的散射激光强度以及脉冲的大小综合分析，报告尿中的有形成分种类和数量，仪器可自动报告红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌5个定量参素数，还可测出尿液电导率指标。另外，研究表明，如果采用定量报告方式(C/μl)，最好采用不离心多数量计数法［9］。尿液离心镜检是将尿液离心再悬浮后镜检计数的一种方法，可能受到离心部分变形溶解或离心沉淀不完全等因素影响，要比实际理论值明显减低［10］。UF－100作为一种尿有形成分流式定量计数仪器，最大检测速度每小时可达到100个样本,用于成形成分快速筛选，进行标本常规定量是适合临床应用的。在大工作量环境下，即保证了检验速度又保证了检测质量，为临床诊断提供了可靠依据［11］。
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6 尿液有形成分检验方法比较
总的看来,显微镜检查方法是尿液有形成分的金标准,在目前仪器分析细胞仍存在许多局限性,产生疑问时必需镜检确诊，但它费时，重复性差，结果随意性大，不易定量，受操作者主观影响，判断不标准，结果不利于临床动态观察。干化学方法具有所需尿量少，操作方法简便，检测速度快，重复性较好，对几项化学成分分析从定性进入半定量报告方式，但它对有形成分检测有一定局限性，尿液中存在一定量的干扰物质，可导致检测结果呈假阴性或假阳性，只适合于临床的初筛工作。尿流式细胞分析仪方法具有标本无须离心，检测速度快，病理成分敏感度及重复性好，且由于每份标本检测步骤模式一致便于质量控制及标准化，但它不能检出滴虫、脂肪滴、病理及药物结晶,也不能识别肿瘤细胞,当尿中存在大量细菌、酵母菌、结晶等颗粒可干扰红细胞计数,也不能识别影型红细胞及病理管型［12］，见表1。
表1 尿液有形成分主要3种检测方法比较（略）
传统手工镜检法由于操作要求高、费时，且不能定量报告结果。随着尿液检查方法的规范化、标准化，尿有形成分定量法测定已被推广。目前可采用尿液干化学分析，尿流式分析仪(UF-100)，尿沉渣手工镜检三者相结合的检测方法。以UF－100型尿流式分析仪和尿液干化学分析作为过筛手段，能够在3小时以内将住院患者尿液标本检测完毕，符合“尿沉渣显微镜检查标准化建议”规定，保证了检验质量并大大提高了工作效率。真正实现了尿沉渣从理化检查到沉渣检查全程自动化，将同一检测目的的几种主要方法有机的整合在一起，对同一份标本的不同方法结果(干化学、尿流式、沉渣计数)进行模式匹配，方法学优势互补，特别是干化学的快速简便和尿流式细胞分析仪对有形成分定量分析的准确性及自动化，从而可以有效地降低手工镜检地劳动强度。采用干化学和尿流式进行过筛不是取消镜检而是更好地镜检，往往仪器给出异常结果，要靠显微镜检查来验证、校准和补充，这样的工作流程是科学的，检验结果是有保证的，是符合检验医学发展趋势的。
参考文献：
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［12］ 程颖，程燃.UF-100全自动尿沉渣分析仪影响因素的探讨［J］.重庆医学，2006，4：346??349.