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作者：袁叶飞，欧贤红，余昕，何颖
【摘要】 目的研究狗脊不同炮制品醇溶性浸出物量及镇痛的作用。方法根据《中国药典》法测定狗脊不同炮制品醇浸出物的量；采用热板法和扭体法研究镇痛作用。结果狗脊经去毛炮制后可以提高醇浸出物的量及镇痛作用。结论膨化法优于其它方法。
【关键词】 狗脊；膨化炮制；镇痛作用
Abstract：ObjectiveTo study the content of the alcohol extract with diferent processing methods from Rhizoma Cibotii and its analgesic effect．MethodsAccording to the “Pharmacopoeia of the People""""s Republic of China”, the alcohol extract content was measured.Methods of mouse writhing response and hot plate were used to study analgestic action.ResultsThe content of alcohol extract was increased and its analgestic action was strengthened after Rhizoma Cibotii was processed and purified．ConclusionExpanded process is better than other methods．
Key words：Rhizoma Cibotii； Expanded process； Analgesic action
狗脊为蚌壳蕨科植物金毛狗脊Cibotium barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎。论文学术科研网中药狗脊具有补肝肾、强腰膝、祛风湿的功效，常用于腰膝酸软、下肢无力、风湿痹痛等症［1］。目前临床上狗脊生制兼用，但以砂烫品入药居多，生用较少。狗脊生品及其砂烫炮制品均具有镇痛作用的药理活性［2］。狗脊生品密被金黄色茸毛，不易除尽，且质硬而坚韧，不利于煎煮或粉碎。因此《中国药典》2005年版规定，狗脊加工炮制为砂烫法，砂烫后质地松脆，易于除去茸毛，便于调剂和制剂。但砂烫狗脊质量不易控制；操作时间长，费工费力，不利于大量炒制；而且炒制时高温、烟熏、过滤及除去茸毛时的灰尘影响环境，对操作人员的身体健康造成不利影响。因此进行狗脊炮制的现代化改革意义重大。为此，笔者通过多次实验研究出膨化炮制狗脊的新方法（另文发表）。本实验对骨碎补的膨化品、生品、砂烫品醇浸出物的量及各炮制品镇痛的作用进行比较研究，为应用膨化技术炮制狗脊提供科学依据。
1 材料
1.1 不同炮制品的制备
1.1.1 狗脊生品
购自南宁医药批发站，经广西中医学院中药鉴定室鉴定为蚌壳蕨科植物金毛狗脊Cibotium barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎。
1.1.2
狗脊砂烫品 根据文献［2］，取净狗脊片，投入加热至180～190℃的细砂中，不断翻动，烫至鼓起，表面深黄色时取出，除去茸毛。
1.1.3 狗脊膨化品
取净狗脊片，置于膨化设备中，膨化压力为1.8 kg/cm2 ，膨化保温时间为5 min，将骨碎补膨化(瞬间释压至常压)至接收器内冷却，粉碎，过40目筛备用。
1.2 试剂
复方氨林巴比妥注射液（安痛定注射液）：西南药业股份有限公司生产，批号06100193，2 ml/支，每毫升含氨基比林50 mg，氨替比林20 mg，巴比妥9 mg。生理盐水：广西南宁百会药业集团有限公司生产，批号0507003。
1.3 动物
昆明种小鼠由广西医科大学动物室提供，动物许可证号：SCXK桂2003-0003。
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2 方法与结果
2.1 醇浸出物比较［3］取骨碎补生品、砂烫品及膨化品各4 g，置100 ml的锥形瓶中，精密加入70%的乙醇溶液50 ml，塞紧，称定重量，静置lh后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸l h；放冷后，取下锥形瓶，塞紧，称定重量，用稀醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤器滤过。精密量取滤液25 ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105℃干燥3 h，移置干燥器中，冷却30 min，迅速精密称定重量， ，以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物，并对三者进行比较。结果见表1。表1 狗脊生品、砂烫品及膨化品醇浸出物比较(略)
结果表明，与生品狗脊相比，各炮制品的醇浸出物均有所升高。测得各炮制品中醇浸出物含量由高到低的顺序依次为膨化品>砂烫品>生品。
2.2 镇痛实验
2.2.1 样品溶液的制备分别取上述狗脊生品、狗脊砂烫品、狗脊膨化品各100 g，加70%乙醇回流提取3次（90，60，30 min），合并滤液，减压浓缩溶剂制成浸膏，分别用NaCl注射液配置成浓度为1.5 g?ml-1的生理盐水溶液，供实验用。取注射用安痛定9支加入42 ml NaCl注射液配置成浓度为0.001 5 g?ml-1的人体等效剂量的生理盐水溶液，供实验作为阳性对照组。
2.2.2 小鼠扭体法［4］
取小鼠50只，随机分为5组，每组10只。分别腹腔注射生理盐水，安痛定注射液0.001 5 g?ml-1，生狗脊醇提液1.5 g?ml-1，砂烫狗脊醇提液1.5 g?ml-1，膨化狗脊毛醇提液1.5 g?ml-1，剂量10 ml?kg-1体重，腹腔注射给药后30 min，再腹腔注射0.6%的醋酸0.2 ml/只，比较15 min内小鼠发生的扭体次数及计算药物对扭体反应的抑制率。结果见表2。表2 狗脊生品、砂烫品及膨化品对醋酸扭体反应的影响(略)
结果表明，狗脊生品、狗脊砂烫品和狗脊膨化品均能降低因醋酸刺激引起的扭体反应次数。各炮制品降低因醋酸刺激引起的扭体抑制率由大到小依次为膨化品>砂烫品>生品。
2.2.3 小鼠热板法［3］
调节金属板温度在(55±0.5)℃，每次取雌性小鼠1只，放在金属板上。记录小鼠出现舔后足所需时间(s)，作为该鼠的痛阈值。凡30 s内不出现舔后足者，弃之不用。实验前再测痛阈1次。将两次痛阈的平均值作为该鼠给药前的痛阈值。选取痛阈值在5～30 s的小鼠50只，随机分为5组，每组10只。分别腹腔注射生理盐水，安痛定注射液0．001 5 g?ml-1，生狗脊醇提液1.5 g?ml-1，砂烫狗脊醇提液1.5 g?ml-1，膨化狗脊醇提液1.5 g?ml-1，剂量10 ml?kg-1体重，腹腔注射给药30 min后，开始测定小鼠的痛阈值。每隔30 min测定1次，共3次。与给药前自身比较以及与生理盐水组比较。若小鼠在热板上60 s仍无痛觉，应立即取出，按60 s计算。结果见表3。表3 狗脊生品、砂烫品及膨化品对小鼠热板反应的影响(略)
表3结果表明，狗脊不同炮制品对热刺激引起的疼痛反应均能明显提高小鼠的痛阈值，有显著的镇痛作用。各炮制品提高小鼠的痛阈值由长到短依次为膨化品>砂烫品>生品。
3 讨论
狗脊3种不同炮制品中醇浸出物测定结果表明，狗脊膨化品的醇浸出物含量最高，其次为砂烫品，最低的为生品。狗脊经砂烫和膨化后，有利于去毛，有利于醇溶物的浸出。
本实验采用化学刺激、热刺激两种实验方法对狗脊不同炮制品进行镇痛作用研究。结果表明，狗脊各炮制品均具显著的镇痛作用。比较炮制对狗脊镇痛作用的影响，结果表明 炮制后作用有所增强，以膨化品作用最强且持久，其次是砂烫品，再其次是狗脊生品。
《中国药典》2005年版规定，狗脊的炮制方法为砂烫法，目的是使药材经高温处理后质地疏松，利于煎出有效成分。但是，砂炒至药材疏松状不易把握火候，往往因为以砂为媒介导致受热不均，出现一部分药材已发生炭化而另一部分药材却炮制不彻底的缺陷。膨化炮制法是将食品膨化应用于中药炮制，使硬质药材在一定的温度和压力下均匀受热，在突然减压的情况下，药材分子间的引力受到破坏，而达到质地疏松的目的。
本实验证明，采用膨化技术炮制狗脊，有利于去毛，膨化炮制后质地疏松，有利于有效成分的溶出，从而提高药效。与砂烫法相比较，膨化法操作简便，只需掌握压力和时间即可，既缩短了加工周期，又避免了砂烫法烟熏、灰尘及挥发气体对操作人员身体的影响。本实验为应用膨化技术炮制狗脊提供了科学依据，值得推广。
【参考文献】
［1］国家药典委员会．中国药典，Ⅰ部［S］.北京：化学工业出版社，2005：156.
［2］鞠成国，曹翠香，史 琳，等.狗脊及其炮制品和狗脊毛的镇痛、止血作用研究［J］.中成药，2005，27（11）：1279.
［3］徐叔云，卞如濂，陈 修.药理实验方法学［M］.北京：人民卫生出版社，2005：882.