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气相色谱质谱联用仪,气相色谱质谱联用原理

医学类 时间:2023-02-07

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作者:庄朴伟,邓林胜,秦双玖,宋发友,逯平杰,周媛

【摘要】   目的分析排风藤中脂肪酸成分及相对含量。方法采用气相色谱-质谱联用技术,对排风藤全草中脂肪酸以石油醚萃取,硫酸甲醇甲酯化后进行测定,用面积归一化法得出各脂肪酸的相对含量。结果从排风藤全草中检出11种饱和脂肪酸和5种不饱和脂肪酸。其中饱和脂肪酸占总含量的30.33%,以棕榈酸含量最高(相对含量24.32%);不饱和脂肪酸占总含量的69.77%,以亚油酸含量最高(相对含量60.19%),还有亚麻酸的含量也较高(相对含量8.46%)。结论此研究结果为排风藤的药用价值开发提供了科学依据。论文学术科研网

【关键词】 排风藤(Solanum cathayanum) 脂肪酸 气相色谱-质谱联用

  Abstract:ObjectiveTo study the constituent of the fatty acids from Solanum cathayanum. MethodsGC-MS was used in the study. The fatty acids from Solanum cathayanum were methylated by refluxing in anhydrous methanol with H2SO4. Results In Solanum cathayanum , sixteen kinds of fatty acids were detected. There were five kinds of unsaturated acids and the total amount was 69.77%. The relative content of 9,12-Octadecodienoic acid was the highest. ConclusionThis study may provide scientific reference for the pharmacological development of Solanum cathayanum.

  Key words:Solanum cathayanum; Fatty acid ; GC-MS

  排风藤Solanum cathayanum为茄科茄属植物,草本藤木,多分枝,长0.5~3 m。茎、叶各部密被多节长柔毛。叶互生,多数为心脏形,叶色淡绿,背青黄,叶多数全缘不裂,少数3裂,浆果成熟时红色,花果期6~9月。生长于海拔200~1 400 m处山坡阴湿处及灌木丛中,产于三峡地区的巴东、长阳、秭归、兴山以及神农架,全国大部分地区均有分布[1]。
排风藤亦为长江三峡库区民间广为使用的民间中草药[2],药用全草,具有清热利湿、解毒消肿之功效。排风藤与红枣的混合煎剂对小鼠艾利虚腹水癌及梭形细胞肉瘤的实体形及腹水有抑制作用,醇提取物对小鼠肉瘤180有抑制作用[3]。

  本文研究了排风藤中脂肪酸成分,将排风藤甲醇提取物以石油醚萃取,萃取部位进行甲酯化处理后用气相色谱-质谱联用技术分离和鉴定脂肪酸成分的组成和相对含量。结果表明,从排风藤低极性部分中共分离鉴定出16种脂肪酸成分,并通过面积归一化法得出各脂肪酸的相对含量。排风藤脂肪酸成分是由棕榈酸 (相对含量24.32%)、亚油酸(相对含量60.19%)、亚麻酸(相对含量8.46%)等组成。

  1 器材与方法

  1.1 材料排风藤于2006??10采自中国湖北恩施,经三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室杨进副教授鉴定为排风藤Solanum cathayanum,该植物标本编号为SC200610ES,并保存于三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室。

  1.2 仪器美国Finnigan公司生产的TRACE型气相色谱-质谱联用仪。

  1.3 试剂氢氧化钾、石油醚(沸程60~90℃)、甲醇、氯仿、无水硫酸钠、盐酸、硫酸等。以上试剂均为分析纯,水为超纯水。

  1.4 脂溶性成分提取排风藤全草干燥,粉碎过80目筛,用甲醇渗滤提取3次,提取液浓缩成浸膏,以水悬浮,加石油醚萃取3次,得石油醚部位浸膏。

  1.5 脂肪酸甲酯化称取石油醚部位浸膏0.5 g于50 ml圆底烧瓶中,加入4 ml 0.5 mol?L-1氢氧化钾甲醇溶液,振荡混匀,60℃恒温水浴30 min,加入2 mol?L-1盐酸酸化,调节pH = 2,加适量乙醚萃取,分取油层,加入2.5%硫酸甲醇溶液置60℃恒温水浴1 h, 进行甲酯化反应,反应停止后加入乙醚、水各2 ml,振摇,萃取,取上层油层, ,再加入2 ml乙醚振摇,萃取,取上层油层,两次萃取液合并,加入无水硫酸钠干燥。分取上层清液挥干乙醚,加入氯仿约1 ml溶解,待测。

  1.6 GC-MS分析条件GC条件:ZB-1MS 型弹性石英毛细管(60 m×0.25 mm×0.25 μm,广州菲罗门科学仪器有限公司);载气为高纯度氦气(99.999%),柱内载气流量1.0 ml?min-1,分流进样;升温程序:180~240℃,升温速度2℃?min-1;200~300℃,升温速度5℃?min-1;300℃保持2 min;气化室温度350℃;进样量1 μl。MS条件:EI源,离子源温度240℃;接口温度290℃;电子能量70eV;扫描范围39~451 amu。

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  2 结果分析

  2.1 排风藤脂肪酸的组成及成分分析按照上述色谱-质谱条件对样品进行分析,获得排风藤脂肪酸成分总离子流图(见图1)以及排风藤脂肪酸成分总离子流图的局部放大图(见图2)。各色谱峰相应的质谱图经人工解析及NIST27和NIST147谱库检索定性,并采用面积归一化法计算出各成分的相对百分含量。共鉴定出16种脂肪酸(见表1),包括:11种饱和脂肪酸和5种不饱和脂肪酸,饱和脂肪酸占总含量的30.33%,分别为十一烷酸(0.20%)、月桂酸 (0.16%)、十三烷酸(0.26%)、肉豆蔻酸(0.11%)、十五烷酸(0.19%)、?榈酸(24.32%)、15-甲基-棕榈酸(0.17%)、十九烷酸(1.89%)、花生酸(0.47%)、二十二烷酸(1.30%)、木焦油酸(1.26%);不饱和脂肪酸占总含量的69.77%,其中单不饱和脂肪酸分别为7-十四烯酸 (0.06%)、棕酮油酸(0.67%)、9-甲基-十八烯酸(0.30%),多不饱和脂肪酸分别为亚油酸(60.19%)、亚麻酸(8.46%)。表1 排风藤脂肪酸成分的组成及其相对含量(略)

  2.2 排风藤脂肪酸成分的功效评价近年来的研究表明,不饱和脂肪酸对人体有降低血脂、胆固醇和血压,抗血栓、动脉硬化,预防心血管疾病,增强记忆力,预防老年痴呆症,防癌等多种作用[4]。亚麻酸有降低血小板聚集之功能[5],亚油酸在人体内不仅能阻止血栓的生成,而且对人体脂类代谢有重要的作用[6]。排风藤中脂肪酸成分的组成中不饱和脂肪酸的相对含量占到69.77%,且主要为多不饱和脂肪酸的亚油酸(60.19%)和亚麻酸(8.46%)。因而排风藤的药用价值有待进一步研究。

  3 结论

  本实验采用气相色谱-质谱联用技术分析脂肪酸成分的组成和相对含量。结果表明,从排风藤中共分离鉴定出16种脂肪酸成分,主要包括棕榈酸 (相对含量24.32%)、亚油酸(相对含量60.19%)、亚麻酸(相对含量8.46%)等。研究结果为排风藤药用价值的开发提供科学依据,并且其脂肪酸种类及含量与排风藤药理活性之间的关系有待进一步研究。

  致谢:感谢三峡大学化学与生命科学学院实验中心潘家荣高级实验师给予的GC-MS操作技术指导。

【参考文献】
  [1]中国科学院武汉植物研究所.湖北植物志[M].武汉:湖北科学技术出版社,2002:3.

  [2]余甘霖,沈 力,易东阳,等.长江三峡库区中草药资源调查研究[J].实用中医药杂志,2005,21(3):187.

  [3]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科技出版社,1977.

  [4]郑建仙.功能性食品,第2卷[M].北京:中国轻工业出版社,1999:146 .

  [5]刘玉军.鱼油二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸的生物效应和作用机理[J].生物学进展,1987,18 (3):230.

  [6]中国油脂植物编委会.中国油脂植物[M].北京:科学出版社,1987:328.

本文来源:http://www.tuzhexing.com/kaoshi/1246498/

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